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堿燒傷致新西蘭兔眼角膜機械損傷模型

模型建立

動物品系:新西蘭兔。

造模方法:生理鹽水沖洗結膜囊,將8 mm直徑濾紙片直接浸泡于1 mol/L NaOH溶液中15 s,置于兔左眼眼角膜正中50 s后取下,迅速用約20 ml生理鹽水沖洗角膜及結膜囊,即刻氧氟沙星滴眼液滴眼,連續滴眼3次。

檢測指標:裂隙燈檢查,角膜新生血管面積


圖片1.png


堿燒傷致新西蘭兔眼角膜新生血管的影響

角膜本身無血管,毛細血管網圍繞角膜緣,如果血管超越角膜緣進入透明區即為病理性。新生血管結構和功能不完善,容易發生血漿滲漏,造成角膜水腫、脂質沉著以及激發的角膜瘢痕化,嚴重影響視力,也使角膜移植排斥反應的發生率大大增加。


圖片2.png


角膜新生血管面積(mm2)

圖片4.png

*同一時間點各組與模型對照組比較有統計學差異(P< 0.05)


角膜新生血管長度(mm)

圖片5.png

*同一時間點各組與模型對照組比較有統計學差異(P< 0.05)


角膜區域VEGF表達強度和累計面積評分


圖片6.png圖片7.png


角膜FITC-Lectin4免疫組化是如何做的,其中角膜FITC-Lectin4是什么?


?角膜FITC-Lectin4免疫組化是一種用于檢測角膜內血管生成的方法?其中FITC是一種熒光素Lectin4是一種能與血管內皮細胞特異性結合的蛋白質2 

?具體操作步驟如下:

1.取出角膜標本,用生理鹽水沖洗,切成適當大小。

2.用甲醛固定角膜標本15分鐘,然后用PBS洗滌3次。 

3.用0.5%的Triton X-100處理角膜標本10分鐘,以增加細胞膜的通透性。

4.用PBS洗滌3次,然后在PBS中加入10%的正常羊血清封閉非特異性結合位點30分鐘。 

5.用PBS洗滌3次,然后加入FITC-Lectin4(稀釋比例為1:100)孵育1小時。 

6.用PBS洗滌3次,然后在暗處觀察和拍攝熒光圖像。 ?