類器官的GFP高通量篩選是指在類器官模型體系中,利用綠色熒光蛋白(GFP)作為報告分子,通過自動化和高通量技術對大量類器官樣品進行快速、系統的檢測和分析,以篩選出具有特定生物學屬性或響應特定干預(如藥物、基因編輯等)的類器官模型。以下是類器官的GFP高通量篩選的簡介:
類器官與GFP標記:
?類器官特性:類器官是通過體外培養,由多能干細胞或成體干細胞自我組織形成的、具有特定器官部分結構和功能的三維細胞培養物。它們能夠模擬真實器官的細胞組成、組織結構和部分生理功能,是研究發育生物學、疾病建模、藥物篩選的理想平臺。
?GFP標記:將GFP基因與類器官中感興趣的基因(如疾病相關基因、藥物靶標基因、標志物基因等)融合表達,或利用GFP報告基因系統監測特定基因的表達、轉錄調控、蛋白質相互作用等過程。GFP的熒光信號可以直觀、實時地反映類器官中目標基因或過程的狀態。
在標志表達的同時即有GFP的表達,以此標記心肌細胞
帶基因熒光蛋白標記的心臟類器官
帶標志基因熒光蛋白標記的心肌細胞
熒光模式用于測試心肌分化比例(GFP%=GFP size/EB size)
普通模式用于計算心臟類器官大小(EB size)